一个人的旅行
潜精研思苦心孤诣
///
在科学探索的道路上，有众多的科学巨人披荆斩棘，铺路架桥，为后人留下了丰硕的知识园地、科学的探究方法及不朽的科学精神。
前言
系统性红斑狼疮（SLE）是一种可累及肝、肾等多脏器功能的自身免疫性疾病，其中狼疮性肾炎（LN）是SLE中最常见的一种靶器官损害。目前免疫抑制剂是LN应用最普遍的治疗药物，如环磷酰胺和霉酚酸酯等，但这些药物在治疗原发病的同时，也会给肾脏带来巨大的负担。加之SLE疾病本身的进展，超过10%的LN患者会进展至终末期肾病。因此仍然需要探索寻求针对LN的靶向治疗药物，有效控制原发病的同时，最大限度减少药物造成的损害。
知识回顾
?巨噬细胞迁移抑制因子MIF是一种公认的促炎因子，可以通过上调多种炎症分子参与炎症与免疫反应的调节。既往研究表明，MIF水平在SLE患者中显著升高并与SLE疾病损害(SLICC/ACR指数)以及狼疮肾LN的进展密切相关。
?miRNA是一种短链的非编码RNA，通过与相应蛋白mRNA的3‘-非翻译区(3’-UTR)互补结合来下调蛋白质的翻译。
本期介绍的文献就是吕叔团队基于以上的研究背景，从MIF这一分子出发，探索miRNA调控MIF,进而减轻LN疾病进展的可能机制，为将来LN的治疗带来全新的策略和思路。
文章于年2月发表于FrontImmunol杂志上（ZhengJY,GuoRR,LuLJ.FrontImmunol.Feb6;10:)
下文为研究工作内容概要。
内容概要
——miR-可通过下调巨噬细胞移动抑制因子诱导的COL1A1的表达，减轻狼疮性肾炎的严重程度(miR-AttenuatestheSeverityofLupusNephritisthroughtheDownregulationofMacrophageMigrationInhibitoryFactor(MIF)-InducedExpressionofCOL1A1)
本次研究所使用的狼疮肾组织样本选自22位符合诊断标准的LN患者，正常人肾组织的对照则选自20例因肾细胞癌而行肾切除的非肿瘤邻近组织。使用荧光素酶报告基因检测目的基因的表达水平；使用RT-PCR检测相关基因；使用WB实验检测相关蛋白；使用LN的组织病理学研究检测肾脏损伤情况；使用免疫组化染色与组织染色定量对MIF分子进行相对的定位与定量。
实验过程及结果分析如下：首先，我们将肾组织中miR-水平与肾活检病理结果进行比较，发现miR-表达水平与肾活检慢性化指数CI相关（图2B）。随后再将miR-的表达水平与实验室检查的相关指标结合比较，结果显示细胞内miR-的表达与血肌酐水平(r=?0.，p=0.)和24h尿蛋白排泄量(r=?0.，p=0.；图3)呈负相关，提示miR-很可能是一种影响LN疾病进展的重要调控分子。
为了进一步探索miR-调控LN的可能机制，我们小组尝试引入促炎分子MIF，分析miR-与MIF之间的联系。首先通过计算机预测程序分析可以与MIF3‘-UTR区域结合的基因序列（图1），在此基础之上构建双荧光素酶报告基因体系来检测不同miR-条件下MIF水平的变化，结果证实MIF的MIF3‘-UTR区域确实是miR-的调控靶点。
之后，我们在体外实验中，使用miR-、miR-模拟物（mimics,）和miR-抑制剂（inhibitors）处理人肾近端小管细胞系(HRPTE)，比较三种不同处理条件下HRPTE细胞系的MIF水平变化，发现miR-可以抑制MIF在HRPTE细胞系中的表达（图5）。我们在肾脏组织RT-PCR实验检测中也发现miR-的表达不仅是明显下调的，而且其表达水平于MIFmRNA呈负相关(P=0.)（图6）这些结果进一步有力的证明了miR-调控MIF的假设。
为了进一步验证针对促炎因子MIF调控的实际临床意义，我们使用RT-PCR，WB以及免疫组化染色实验比较MIF在LN组织与正常肾组织中的含量。发现在LN患者中MIF不论是mRNA或是蛋白水平都明显高于正常对照（图7）。并且组化染色显示MIF分子大多集中于肾小管区（图8）。随后再将MIF的表达水平和临床检测指标相结合，发现MIF与血肌酐和24h尿蛋白排泄量呈正相关(P0.05)（图8）。
研究结果
以上结果说明MIF在LN中的高表达是影响LN疾病进展的重要致病因素，miR-对MIF的调控具有重要的临床价值。
原文链接：